血癌抑制因子及表皮生長因子對著床前期小鼠胚胎發育之訊息傳遞研究

簡介：白血病抑制因子（LIF）是一個影響胚胎發育及建立懷孕著床重要因素。我們先前的報告發現，經由基因晶片分析小鼠LIF胚胎在原核期基因缺乏時，會導致著床前囊胚期的基因表達發生變化。此外，當LIF缺乏時，表皮生長因子的表現量會因為補充白血病抑制因子而增加了囊胚率及表皮生長因子的表現。本研究的目的是探討白血病抑制因子和表皮生長因子，在植入前小鼠胚胎發育階段對其信訊息傳遞的關係。

方法：我們收集B6CBF1品系小鼠的原核期胚胎，並添加不同的抑製劑或不50微克白血病抑制因子或表皮生長因子蛋白。我們針對已確定的三條白血病抑制因子和表皮生長因子的訊息傳遞路徑做分析。我們對植入前小鼠胚胎的檢測這些訊息傳遞後磷酸化蛋白的改變。我們利用免疫組織化學染色檢測以觀察胚胎發育時期訊息傳導路徑中MEK1（Ser221），MEK1（A221），STAT3蛋白（Ser727），STAT3蛋白（Ab727），蛋白（Thr308）和Akt（Ab308）蛋白磷酸化的程度。

結果：我們的結果發現EGF和LIF的途徑同時存在於老鼠著床前期的胚胎，當加入不同濃度這些訊息傳遞的抑制劑時，胚胎發育率分別下降，但是可以發育到囊胚期的胚胎大小與控制組比較並沒有明顯的改變，因為加入過量抑制劑而死亡的胚胎經細胞凋亡試驗呈現呈陽性反應。

結論：我們發現體外培養的胚胎，其白血病抑制因子和表皮生長因子可能共用STAT3這一訊傳遞路徑。而了解白血病抑制因子和表皮生長因子在胚胎發育的信號轉導的關係可以更有效的了解胚胎發育在生殖醫學的應用。